Amerikalı iki genç kız, birlikte Avrupa tatiline çıkarlar. Tatilleri sırasında Almanya'da arabaları bozulunca yardıma ihtiyaç duyarlar ve karşılarına bir ormanın ortasında bulunan bir villa çıkar. Sabah olduğunda kendilerini hiç tanımadıkları bir Japon turistle beraber eski bir mahzende bulurlar. Kendilerini bu mahzene hapseden kişi, eski bir cerrah olan Dr. Hieter'dir. Zamanında siyam ikizlerini ayırma konusunda başarısı ile tanınan doktor, kendi hastalıklı düşüncelerini bu üç tutsağı üstünde denemeye kalkacaktır.

Bir üçleme olarak tasarlanan The Human Centipede (First Sequence) - İnsan Kırkayak, oldukça düşük puanına rağmen 8 ödül kazanmış bir yapım.